免疫电镜技术

免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物，是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。

其原理是利用抗原抗体特异性结，在一张超薄切片上，用特异性一抗与待检测抗原结合，然后用带有胶体金标记的二抗与一抗抗原复合物结合。

在电子显微镜下观察，胶体金为黑色颗粒状物质，能清晰指示出相应抗原所在的部位，使得抗原和抗体定位的研究进入到亚细胞的水平。

服务流程

实验流程

① 取样固定

组织：取下后立即使用免疫电镜固定液，4℃保存或4°℃冰袋运输。在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

细胞、细菌：离心收集细胞或细菌沉淀，要求沉淀最少绿豆大小。加入免疫电镜固定液重悬混匀固定，4℃固定保存及运输。

样品固定后应尽快安排做后续包埋和免疫标记实验，减少抗原丢失的可能性。

免疫电镜固定液配制

1. 将600毫升蒸馏水放入微波炉加热至60°C;

2. 加入11.5 g Na2HPO4(无水)(MW: 141.96);

3. 加入40 g多聚甲醛(MW: 30.03)，在60°C下摇匀。可能需要30分钟溶解;

4. 加入2.62 g NaH2PO4•H2O (MW: 137.99);

5. 将溶液过滤到Erlenmeyer烧瓶中，加入2ml饱和苦味酸(MW: 229.11);

6. 用蒸馏水配制1升;

7. 冷却并保存在4°C直到使用;

使用前加入4 ml戊二醛(25%)

② 树脂包埋

清洗样本--琼脂包裹凝固--梯度酒精脱水--树脂渗透--纯树脂包埋--低温聚合

③ 超薄切片

超薄切片机切片50-80nm超薄切片，镀膜镍网捞片， 4℃保存。

④ 免疫标记

用特异性一抗与待检测抗原结合，然后用带有胶体金标记的二抗与一抗抗原复合物结合

⑤ 电镜拍照

上机观察(放大倍数0.2K-600K)，根据实际情况选取合适倍数合适视野拍照。

拍照案例

小鼠神经胶质瘤细胞案例：

其他案例：

服务承诺

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以研究为首任，以客户为中心，凭借技术平台，坚持优质服务，为您提供全方位的实验解决方案！

设立内部质控严格把控质量关，与客户全程互动沟通，服务流程可监督，杜绝任何形式的不端行为。

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