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样本类型 |
最低送样量 |
预处理及保存 |
胶点 |
2D 胶点 |
肉眼可见 |
用移液枪头将 2D 点挖下来,转入 EP 管中,做好标记,冰袋寄送 |
胶条 |
SDS-PAGE 条带 |
肉眼可见 |
将需要鉴定的 SDS-PAGE 条带切下,转入 EP 管中,做好标记,冰袋寄送 颜色非常浅的条带可取多个重复样本放一起 |
蛋白 |
冻干粉 |
50ug |
样品转入 EP 管中,做好标记,冰袋寄送 |
蛋白溶液 |
20ug以上的蛋白量(且蛋白浓度不低于0.1 μg/μL) |
样品转入EP管中,做好标记,冰袋或干冰寄送 Buffer要求:溶液中不能含有Triton100、NP40、CHAPS等去垢剂 |
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培养基 |
15 mL以上 |
1. 培养基样本不含血清或添加人工生物营养素; 根据细胞或菌体的蛋白分泌和细胞状态确认收集持续时长; 培养基样本需要经过过滤去掉细胞成分; 500 g离心5分钟去掉原培养基,使用无血清培养基清洗细胞三遍,用无血清培养基培养细胞24 h以上;500 g离心5分钟收集培养基;使用0.22 μm的滤膜过滤去除细胞或菌体;液氮速冻,-80 ℃保存,干冰寄送。
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动物组织 |
常规动物组织(心、肝、脾、肺、肾、肠、脑、肌 肉等) |
100mg |
PBS 洗涤去除残留血液和污染物,迅速剥去脂肪和筋皮等结缔组织,冲洗干净,用组织剪或手术刀将组织分离成 1cm3 左右的小块,液氮速冻,保存于-80℃ |
软骨组织 |
100mg |
PBS 洗涤,用手术刀将软骨切成 1cm3 左右的小块,液氮速冻,保存于-80℃ |
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软体动物(吸虫等) |
100mg |
PBS 洗涤去除来自宿主的污染,液氮速冻,保存于-80℃ |
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植物组织 |
大本植物茎、叶、花等 |
200mg |
PBS 清洗,吸水纸吸去表面液体,液氮速冻,保存于-80℃ |
大本植物树根、树皮、树枝等 |
200mg |
PBS 清洗,吸水纸吸去表面液体,液氮速冻,保存于-80℃ |
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种子 |
500mg |
PBS 清洗,吸水纸吸去表面液体,液氮速冻,保存于-80℃ |
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果肉 |
2g |
去皮切成 1cm3 左右小块,液氮速冻,保存于-80℃ |
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草本植物、藻类、蕨类等 |
200mg |
PBS 清洗,吸水纸吸去表面液体,液氮速冻,保存于-80℃ |
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花粉 |
200mg |
植物开花期收集花粉,解剖显微镜下检查花粉,用解剖针去除花药碎片等杂质,转入 EP 管中,光学显微镜下检查花粉的形态和纯度,保存于-80℃ |
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微生物 |
细菌类 |
200mg |
3000rpm-5000rpm 离心 5-15min,去上清,PBS 洗涤沉淀三次,液氮速冻,保存于-80℃ |
真菌类(菌菇) |
2g |
PBS 清洗,吸水纸吸去表面液体,液氮速冻,保存于-80℃ |
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细胞 |
悬浮培养细胞 |
10^6 个 |
400rpm-1000rpm 离心 10 分钟收获细胞,弃上清,用预冷的 PBS 小心洗涤片状沉淀物 2 次,置于冰上, 去上清,液氮速冻,保存于-80℃ |
贴壁培养细胞 |
10^6 个 |
1.弃掉培养液,并将培养皿倒置于吸水纸上吸干培养液; 2.加入 4℃预冷的 PBS,平放轻轻摇动 1 分钟洗涤细胞,然后弃去 PBS,重复以上操作两次以洗去培养液 3.将培养皿置于冰上,向培养皿内加入 4℃预冷的 PBS,用干净的细胞刮棒将细胞刮于培养皿的一侧(动作要快),冰上斜置培养皿,使得缓冲液流向一侧,用移液管吸取溶解产物至预冷的离心管内,离心去上清。 4.液氮速冻,保存于-80℃。 |
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体液 |
血清 |
100ul |
收集好的全血室温静置两小时,3000rpm 离心 10min,取上清,液氮速冻,保存于-80℃ |
血浆 |
100ul |
收集好的全血加入抗凝剂,室温静止 30 分钟,1300rpm-2000rpm 离心 10min,取上清,液氮速冻,保存于-80℃。 |
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尿液 |
10ml |
5000rpm 4°C 离心 30-60min,取上清, 保存于-80℃。 |
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唾液 |
1ml |
禁食两小时以上,上午取样,1000rpm-2000rpm 离心 5min,(或使用 0.22μm 滤膜过滤),取上清,保 存于-80℃。 |
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